胰腺导管腺癌（PDAC）是最致命的癌症之一，其秉性是致死率高、调治领受有限。免疫调治，尽头是免疫检查点阻断（ICB）疗法，在调治玄色素瘤和非小细胞肺癌等癌症中已发达出显耀疗效，但很多PDAC患者对ICB疗法的反映性差，这主要由肿瘤的低免疫原性和免疫约束性肿瘤微环境（TME）导致。约束表不雅遗传调治因子（如SETDB1、KDM5B和PHF8）可携带回转录转座子（retrotransposons）介导的免疫反映，从而增强肿瘤对免疫调治的明锐性走光 偷拍，在肿瘤调治中糜掷出路，但这在PDAC中尚不皆备明晰。近日，一项发表于Gut的究诘细目了MED12通过回转录转座子的表不雅遗传千里默在重塑免疫TME中的要害作用。
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为了细目调治免疫监视的成分，究诘者在免疫健全或免疫舛错小鼠的PDAC肿瘤模子中进行了体内CRISPR-Cas9表不雅遗传筛选。
01
体内CRISPR-Cas9筛选细目MED12为胰腺癌中TME的调治因子
究诘者使用C57BL/6J小鼠的KPC1199 PDAC细胞系进行体内CRISPR-Cas9筛选，并转导了两个区别包含6030个针对1036个表不雅遗传因子的单链向导RNA（sgRNA）和120个对照sgRNA的文库。在免疫健全（C57BL/6J）和免疫舛错（NSG）小鼠中进行筛选，细目MED12为PDAC中调治TME的要害因子。MED12缺失显耀促进了免疫细胞，尽头是CD8+T细胞、NK细胞和NK1.1+T细胞在肿瘤中的浸润和细胞毒性。
02
MED12缺失增强PDAC对ICB调治的明锐性走光 偷拍
究诘者在KPC1199皮下和原位模子中评估MED12缺失对ICB调治的影响。成果泄漏，MED12缺失的肿瘤对PD-1阻断调治泄漏出更高的明锐性，发达为肿瘤体积显耀松开和活命期延迟。
03
MED12缺失通过核酸感应途径携带I型侵略素和NF-κB信号
究诘者对MED12缺树报怨照KPC1199细胞进行RNA测序和及时定量PCR分析。成果泄漏，MED12缺失激活了I型侵略素和NF-κB信号通路，增多了MHC I类分子的抒发，促进了抗原科罚和呈递。该效应通过内源性dsRNA触发的核酸感应途径介导。
04
MED12约束H3K9me3标识的回转录转座子
究诘者通过CUT&Tag分析和Western blot分析评估MED12对HP1A和H3K9me3标识的回转录转座子的影响。成果泄漏，MED12通过与HP1A互相作用踏实了HP1A，并匡助其锚定在H3K9me3修饰的异染色质上，从而约束了回转录转座子的转录。MED12缺失导致HP1A下同一回转录转座子去约束。
05
MED12缺失增多H3K27Ac千里积以增强回转录转座子激活和免疫反映
究诘者遴选BRD4约束剂JQ1科罚MED12缺失的KPC1199细胞，评估H3K27Ac水平的变化。成果泄漏，MED12缺失增多了H3K27Ac在回转录转座子和基因组动手子区域的千里积，促进了回转录转座子的转录和免疫反映。JQ1约束了该效应，证据了H3K27Ac的作用。
06
MED12在东说念主PDAC细胞系中的作用
究诘者在多种东说念主类PDAC细胞系（PANC-1、Mia Paca2、Patu8988T和AsPC1）中敲除了MED12。成果泄漏，MED12水平与免疫反映通路、回转录转座子水平以及袭取ICB调治的PDAC患者的预后呈负关联。MED12低抒发的患者对ICB调治的反映更好，活命期更长。
该究诘强调了MED12通过回转录转座子的表不雅遗传千里默在重塑免疫TME中的要害作用，为增强肿瘤免疫原性和克服PDAC中的免疫调治相悖提供了潜在的调治靶点。
参考文件：Tang Y， Tang S， Yang W， et al. MED12 loss activates endogenous retroelements to sensitise immunotherapy in pancreatic cancer. Gut. Published online August 31走光 偷拍， 2024. doi:10.1136/gutjnl-2024-332350